血液
1. 在已加入抗凝剂(EDTA)的新鲜全血中加入等体积PBS(1×),充分混匀;
2. 缓慢转入另一已加入淋巴细胞分离液的离心管中,并使上述混合液处于淋巴细胞分离液液面之上(即两种液体不要混合,保留清晰的界面),3000 g离心30 min;
3. 用移液枪小心分离出白细胞层;用PBS(1×)清洗白细胞,离心回收白细胞,弃去上清;
4. 加入白细胞20 倍体积的TRIzol 试剂,用一次性注射器进行反复抽打细胞直至看不见成团的细胞块,使之充分溶解于TRIzol 中形成清亮不粘稠的液体;
5. 放入干冰或-80℃冰箱中保存。