组织芯片制作流程

组织标本收集处理操作流程

组织标本的收集

每例标本取9块：癌肿组织3块、癌旁组织（距离肿瘤组织37.5px）3块、癌旁“正常组织”3块

          液氮保存（各3块）                                           超低温冰箱

         70%分析级乙醇（各3块）         

         10%中性缓冲福尔马林溶液（各3块）                 病理石蜡块

组织标本的处理

1. 组织标本取材，每块组织分割成5mmX15mmX15mm大小。

2. 用ASP300全自动组织脱水机对组织标本进行脱水处理。（下为脱水处理程序）

3. 用石蜡包埋机将组织标本包埋成病理石蜡块。

4. 用全自动石蜡切片机对病理石蜡块切片制成4微米厚的病理组织切片。

5. 用全自动染色机对病理组织切片进行HE染色。（下为HE染色程序）

组织芯片的制备流程

1. HE染色切片病理诊断，并标记病变组织的范围。

2. 按照实验目的设计组织芯片阵列的组织类型和排列方式。

3. 在组织数据库中选择合适的组织病例编号。

4. 按照组织病例编号从组织库中取出组织蜡块和对应的HE染色切片。

5. 用组织包埋机制备合适的空白受体蜡块。

6. 用组织阵列仪按照阵列设计抽提病理蜡块组织芯并有规律的排列在空白受体蜡块上。

7. 组织阵列块在52℃恒温烤箱中加热融合，使组织芯与受体蜡块紧密相连。

8. 用全自动组织切片机以20微米/转的进刀速度对组织阵列块进行修整蜡块，直至80%的组织芯完全曝露。

9. 用全自动组织切片机以4微米/转的进刀速度对组织阵列块进行切片，切片裱附在防脱片处理的进口载玻片上。

10. 阵列切片置于60 ℃恒温烤箱中烤片16个小时。

11. 组织芯片按编号每隔10张抽取一张作HE染色。

12. 病理医生对抽检组织芯片中每一个组织样本进行复诊质检，结果由信息部输入组织芯片数据库。

13. 组织芯片实验白片保存在切片盒中，置于冰箱4 ℃冷藏室保存。

14. 对使用过的病理组织蜡块封蜡，并将其和对应的HE染色切片归位放回蜡块柜和切片盒。