实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。每个模板的Ct值与该模板的起始拷贝数的对数存在线性关系,起始拷贝数越多,Ct值越小。利用已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线,其中横坐标代表起始拷贝数的对数,纵坐标代表Ct值。因此,只要获得未知样品的Ct值,即可从标准曲线上计算出该样品的起始拷贝数。
样本要求
1、请尽量提供新鲜冻存的标本,或直接提供纯化好的总RNA/DNA;
2、样品需求量:组织(100-200mg),细胞(>106),血液(1ml),血清或血浆(1ml),总RNA(>1μg);
3、请提供已知的全长基因序列或GeneBank号;
4、请提供尽可能详细的背景资料:DNA/ RNA来源、基因丰度等。