技术原理
诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells, iPS cells)最初是日本人山中申弥(Shinya Yamanaka)于2006年利用病毒载体将四个转录因子(Oct4, Sox2, Klf4 和c-Myc)的组合转入分化的体细胞中,使其重编程而得到的类似胚胎干细胞(ES)的一种细胞类型。
应用
1) 建立人类疾病iPS细胞库;
2) 建立特定疾病的细胞模型(个性化模型);
3) 疾病模型的建立用于药物筛选等;
4)干细胞水平的治疗(人性化治疗)。
平台的特色
1)取材灵活(外周血、尿液、皮肤、牙周间充质)
2)非整合型质粒电转、不用shp53(无整合)
3)Xeno-free培养、全体系无血清(无异源性物质)
4)高效安全基因修复或建模打靶(无整合,效率30%以上)
非整合型hiPS细胞建系服务简易模式图:
非整合型hiPS细胞建系服务流程及周期:
项目 | 服务 | 方法类型 | 价格 | 周期 |
iPS细胞建系 | 非整合型hiPS建系 | 成纤维细胞诱导 | 询价 | 4~5月 |
非整合型hiPS建系 (Xeno-free) | 尿液脱落细胞诱导 | 询价 | 3~5月 | |
非整合型hiPS建系 (Xeno-free) | PBMC诱导(见备注2) | 询价 | 3~4月 | |
iPS相关技术服务 | 核型显代分析 | 核型分析 | 询价 | 1~2周 |
多能性基因qPCR检测 | RT-qPCR | 询价 | 1~2周 | |
核心基因免疫荧光染色 | 免疫荧光 | 询价 | 1~2周 | |
核心基因甲基化检测 | BSP法检测 | 询价 | 1月 | |
畸胎瘤三胚层分化检测 | 裸鼠成瘤 HE染色 | 询价 | 1~2月 | |
iPS细胞的长期保存与复苏服务 | 需提供iPS细胞 | 询价 | 2~3周 | |
PBMC分离培养长期保存与复苏服务 | 需提供新鲜抗凝外周血3~5 mL | 询价 | 2周 | |
尿液脱落细胞分离培养长期保存与复苏服务 | 需提供新鲜干净尿液250 mL | 询价 | 1月 | |
支原体检测服务 | PCR鉴定 | 询价 | 1周 | |
支原体灭除服务 | 询价 | 2~4周 | ||
MEF feeder细胞制备 | 询价 | 3~4周 | ||
iPS细胞培养方法的培训及指导 | 客户免费 | 1周 |
备注:
(1) 非整合型hiPS建系服务,客户仅需提供病人或对照组人新鲜外周血3-5ml,或新鲜尿液200-300ml、或皮肤活检样本、或人类成纤维细胞系,就可进行疾病特异性的hiPS细胞建系;
(2) 在用PBMC作为材料进行hiPS细胞诱导时,我们有CD34+T细胞诱导和有核红细胞诱导两种选择,其中有核红细胞诱导可以有效地避免淋巴细胞中染色体重排的影响;
(3) 非整合型hiPS建系服务,我们每个样本最终提供2株hiPS细胞系,并提供细胞系的一些基础检测,如染色体数目检测、疾病基因型检测、XY检测。如每个样本需要建更多系,只需要另外支付少量费用;
(4) 血液抽取及培养方法方便,只需提供3~5ml外周血,1周就可以完成电转。尿道上皮细胞获取更为无创,但培养时间长。皮肤活检样本,需体外培养建系的过程,时间也相对较长。