CD24 signalling through macrophage Siglec-10 is a target for cancer immunotherapy
Nature. Author manuscript; available in PMC 2020 Jan 31.
该nature文章从公共数据库的原始测序数据开始,自己构建表达矩阵,自己对细胞进行质量控制,自己走单细胞标准流程,就是5个R包,分别是:scater,monocle,Seurat,scran,M3Drop 需要熟练掌握它们的对象,:一些单细胞转录组R包的对象 分析流程也大同小异:
step1: 创建对象
step2: 质量控制
step3: 表达量的标准化和归一化
step4: 去除干扰因素(多个样本整合)
step5: 判断重要的基因
step6: 多种降维算法
step7: 可视化降维结果
step8: 多种聚类算法
step9: 聚类后找每个细胞亚群的标志基因
step10: 继续分类
文章描述流程如下:
因为原文有标记细胞类群,也有marker,所以作者很容易出图如下:
就查看自己感兴趣的基因就好了,毕竟是要使用公共数据库来辅助自己的生物学故事啦。同样的可以看到6个病人,他们的肿瘤细胞是具有病人异质性的,虽然整体是肿瘤细胞,但是病人与病人直接区分的很开,但是其它细胞就是细胞类型特异性很明显,多个病人的同一个细胞类型会被整合在一起。
热图展示每个细胞亚群的marker基因也是标配啦
本文不一样的是区分病人来看自己感兴趣的基因的表达情况。
希望这次分享对你的课题有帮助,尝试多看文献,共数据库挖掘需要的基础linux和r技巧好好掌握。
出自生信技能树