蛋白水平的单细胞技术——质谱流式细胞技术（Mass Cytometry，CyTOF）
CyTOF采用金属同位素标记的特异性抗体来标记细胞表面和内部的信号分子（蛋白），标记好的细胞通过流式被分离成单个细胞依次进入电感耦合等离子体质谱（ICP-MS），单细胞首先被等离子体炬离子化为一个独立的离子云，随后离子云中的各种标签金属离子被质谱精确检测出来，得到单细胞的质谱数据。最后数据被转换为标准的流式数据，通过普罗亭专业的生信分析团队进行多维度的数据分析，实现对细胞表型和信号网络的精细表征以及价值信息的有效挖掘。
质谱流式检测原理图
单细胞42个Marker同步检测，深入研究各细胞亚群的功能及细胞亚群间的联系
实现更加精细的细胞分型
同步实现对单细胞表型、信号通路及功能的数据整合分析
Barcode不占用通道，实现更多样本同步检测，降低批间差异
多样化的数据处理方式，实现对样本的深入数据挖掘
免疫
免疫表型研究
免疫系统发育
免疫细胞功能多态性分析
自身免疫疾病发病机制
肿瘤
干细胞
药物研究
其他
血液样本
使用 EDTA 抗凝真空采血管（BD 紫头）采集全血 5~10 mL，单个核细胞总数至少3×10^6，立即轻轻颠倒混匀，做好标记，2~8℃储存及运输，离体 48 小时内送达检测中心。
骨髓样本
使用 EDTA 抗凝真空采血管（BD 紫头）采集骨髓 1~2 mL，单个核细胞总数至少3×10^6，立即轻轻颠倒混匀，做好标记，2~8℃储存及运输，离体 48 小时内送达检测中心。
胸腹水样本
使用 50mL 离心管或无菌瓶收集胸腹水，单个核细胞总数至少 3×10^6，做好标记，用封口膜密封，2~8℃储存及运输，离体 48 小时内送达检测中心。
单细胞悬液样本
细胞总量至少 3×10^6，活率 90%以上。培养的细胞置于培养瓶中，做好标记；制备单细胞悬液重悬于培养基或 1×无钙镁 PBS+0.5%BSA 中，做好标记，用封口膜密封。2~8℃储存及运输，离体 48 小时内送达检测中心。
组织样本
获取新鲜手术切除的组织（一般 0.5g 左右，消化至少得到 1×10^6 细胞），用 1×无钙镁PBS 洗净组织中的血液和污物，放入加满 2mL 或 5mL 美天旎组织保存液（Miltenyi）保存管中，确保组织被保存液完全浸没，做好标记，用封口膜密封，2~8℃储存及运输，离体48 小时内送达检测中心。
冻存细胞样本
组织消化的原代细胞悬液、培养的细胞、血液分离的 PBMC 使用冻存液进行冻存，冻存前细胞计数至少 3×10^6，活率在 90%以上。干冰运输，运输途中必须保证细胞处于低温冷冻状态。
近日，墨尔本大学University of Melbourne的研究团队开发了一种实验方法，应用质谱流式技术，通过体外细胞实验、体外全血化验和体内大鼠模型追踪纳米胶囊，并就其大小对体内相互作用的影响进行研究。研究结果表明，纳米颗粒尺寸的减小降低了与吞噬血细胞的关联，延长了体内大鼠模型的全身暴露。这项研究引领了研究生物纳米相互作用的有效方法。
参考文献：
与慢性乙型肝炎病毒感染相关的肝细胞癌往往对免疫检查点封锁反应不佳。Yang Cheng, Evan Newell及其团队应用质谱流式技术及多肽- mhc四聚体染色技术，对肿瘤浸润T细胞的抗原特异性及其与肿瘤控制的相关性进行了研究。
研究团队对来自46例HCC患者的血液、肝脏和肿瘤组织的未扩增细胞进行了检测，共检测到91种不同抗原特异性的CD8+ T细胞群，靶向乙肝病毒、新抗原、肿瘤相关和疾病无关抗原。研究发现，非终末期衰竭的hbv特异性CD8+ Trm细胞表现出积极参与和有效抗肿瘤反应的特征，这意味着可以将这些细胞用于治疗。
参考文献：
Sanofi Pasteur York University的研究团队开发设计了一个平台，应该质谱流式技术，使用新鲜全血样本作为关键成分，进行高维单细胞分析监测，以研究对疫苗配方的适应性免疫记忆反应。该方法能够在不需要人类接触的人体模型中捕捉疫苗驱动反应的复杂性，前所未有地从单细胞水平详细描述生物学相关变化。这种被称为免疫制图法的方法有可能改变在临床开发之前及整个过程中评估新疫苗的方式。
参考文献：
COVID-19重症与功能失调的免疫反应和不受限制的免疫发病机制有关，但目前尚不清楚T细胞在其中的作用。近日，Universitätsmedizin Berlin的研究人员发表研究成果，应用质谱流式技术，结合单细胞转录组学和蛋白质组学与机制研究，对致病T细胞的功能和诱导信号进行评估，在重症COVID-19中发现了细胞毒性增加的活性CD16+ T细胞。这一特征在其他疾病中未观察到，这提示了调节失调和细胞损伤的产生与此相关，并可能与年龄依赖性反应有关。
参考文献：
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