Can Get Signal® Immunoreaction Enhancer Solution
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价格表

Can Get Signal Solution 1 & 2

Code No.包装价格保存温度
NKB-101T各50mlRMB2004℃
NKB-101各250mlRMB7004℃
Can Get Signal Solution 1
Code No.包装价格保存温度
NKB-201250mlRMB3804℃
Can Get Signal Solution 2
Code No.包装价格保存温度
NKB-301250mlRMB3804℃
用途



本试剂可作为一抗及二抗的反应液(稀释液)使用,具有提高Western Blot分析及ELISA灵敏度、特异性的功能。
本试剂由Solution1和Solution2组成,均可作为一抗及二抗的反应液使用。其溶液都经过最优化处理,故能抑制背景信号,可得到高信号的结果。





特征


●改善了灵敏度及特异性

在保持高特异性的基础上,对抗原抗体反应具有很强的促进效果,与以往的方法相比可得到高几倍到几十倍的信号。特别是对反应性低的抗体的效果更为显著。   

●广泛的适用性

可用于各种使用标记抗体的化学发光检测体系、化学显色检测体系以及荧光检测体系等。

●使用方便的Ready-to-use型

已经按照使用浓度进行了配制,无须进行稀释。

原理


实验例

1.通过Western Blot检测磷酸化蛋白质

向培养牛肾上腺髓质chromafin细胞培养液里添加任意浓度的胰岛素,进行5分钟刺激后,以细胞的裂解物为样品,通过Western Blot法检测磷酸化Akt及ERK蛋白质。结果可见,与以往方法(使用TBS-T)相比,使用Can Get Signal得到的信号明显增强而背景很低。



*数据由宫崎大学医学部药理学教研室的柳田俊彦老师提供。


2. 通过Western Blot检测EGFR

通过Western Blot检测人的扁平上皮細胞(A431)中EGFR(Epidermal Growth Factor)的表达。以A431细胞的裂解液为样品,一抗反应用Can Get Signal® Solution 1[一抗:抗人EGFR抗体(mouse IgG1)],二抗反应用Solution 2

[二抗:抗小鼠IgG(Fab Specific, HRP标记)]进行检测。   


另外,作为对照,用TBS-T(以往方法)进行同样的实验。结果可见,用以往方法非特异性条带很浓,几乎无法检测出目的条带,而用Can Get Signal则非特异性条带显著减少,同时可确认到信号增强。


3.通过ELISA检测His-tag融合型ERK2蛋白质


使用无细胞蛋白质合成法合成的人来源的His-tag融合型MAP激酶(His-ERK2),通过三明治ELISA法(固相抗体:抗ERK2单克隆抗体、1抗:抗His-tag多克隆抗体、2抗:抗兔IgG-HRP抗体)进行检测。结果可见,通过在市售的封闭液中进行抗体反应的原方法,几乎得不到检测结果。而使用Can Get Signal,则无论在低浓度区域还是在高S/N比的条件下均可得到高灵敏度的检测结果。





参考文献1)N. Watanabe, et al., Proc Natl Acad Sci U S A., 102(33):11663-8.(2005)
2)M. Katsuno, et al., Proc Natl Acad Sci U S A; 102(46):16801-6.(2005)
3)K. Shimono, et al., J Biol Chem.,280(47):39436-47.(2005)
4)Y. Matsuzono, et al., J Biol Chem., 281(1):36-42.(2006)
5)T. Hanada, et al., Autophagy. 2:110-118.(2006)
6)T.Sugano et al.,J.Neurochemistry.98:20(2006)


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