Can Get Signal® immunostain Immunoreaction Enhancer Solution
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用途

免疫组织染色、免疫细胞染色

说明

作为免疫组织染色的抗体反应液(稀释液)使用,具有改善实验灵敏度及特异性的功能。Can Get Signal® immunostain是在深受好评的Western Blot、ELISA用Can Get Signal® 的基础上改良的免疫染色专用抗体反应缓冲液。本试剂备有反应促进效果不同的Solution A和B,初次使用时,可用Starter Set进行测评。Solution A和B都可用于一抗及二抗(标记抗体)的反应,和分别对应于1抗和2抗的Can Get Signal® 的Solution 1和2不同。



特征

●改善了灵敏度及特异性

在保持高特异性的基础上,对抗原抗体反应具有很强的增强效果,与以往的方法相比可得到高S/N比的良好信号。另外,减少了2抗的使用量,抑制了背景信号,可得到更加清晰的图像。

●广泛的使用性

可用于化学显色、化学发光以及荧光等检测体系。也可与ABC法、Polymer Complex法等增强灵敏度的系统一起使用。

●使用方便的Ready-to-Use型

无须稀释,可直接当作抗体稀释液使用。

原理


实验例

1.通过免疫组织染色检测PCNA(增殖细胞核抗原)

用通过人皮肤组织模型TESTSKINTM制备的石蜡包埋切片作为抗原,分别使用抗PCNA鼠的单克隆抗体作为1抗,2抗的生物素标识抗鼠IgG抗体、通过免疫组织化学染色对PCNA进行检测(ABC法)。分别用Can Get Signal® immunostain(使用Solution A)和含1.5%马正常血清的PBS (以往方法)对抗体的反应进行染色效率的比较。结果可见,与以往方法相比,使用Can Get Signal® immunostain可得到高信号、低背景、明亮的染色图像。

2. Olig2染色与以往方法的比较探讨

用1%BSA/PBS、Solution A或Solution B稀释的Anti-Human Olig2 Rabbit IgG和Alexa 594 goat anti-rabbitIgG(H+L)来检测人・脑肿瘤(glioblastoma)[石蜡包埋切片]的Olig2的染色。结果可见,用以往方法信号很微弱,而用Can Get Signal® immunostain信号可得到增强。特别是用SolutionA的情况下,染色非常明亮,且抑制了背景。但考虑到非特异性反应,从观察角度来讲用Solution B也足够了。

3.CD133免疫染色与以往方法的比较探讨

用1%BSA/PBS、Solution A、Solution B作1/35稀释的Rabbit polyclonal to CD133-Stem Cell MarkerとEnVision(Dako ChemMate)来检测人・脑肿瘤(glioblastoma)[石蜡包埋切片]CD133的染色。结果可见,用以往方法信号很微弱,而用Can Get Signal® immunostain 信号可得到增强。但是,用SolutionA的情况下背景很高,整体来看染色程度与以往方法差不多,不适合观察。而用Solution B,通过抗体稀释倍率的最适化,可看到更好的染色条件。

参考文献

1)K. Moriguchi, et al., Plant Cell.,17(2):389-403.(2005)

2)Tokuda M, et al., BIOLOGY OF REPRODUCTION 76:130-141.(2007)
3)K. Tamura, et al., The Plant Cell 19:320-332(2007)
4)H. Ii, et al., Biological &Pharmaceutical Bulletin 31 (3):363.(2008)
5)K. Tokuhiro, et al., Asian J Androl 10(5):711-718.(2008)
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