抗体芯片样本

抗体芯片样本相关

* 哪些类型的样本可用于抗体芯片检测？

细胞裂解物、组织提取物以及血清样本都可用于抗体芯片检测分析。

* 抗体芯片检测是否需要设定对照？

我们推荐使用抗体芯片检测时同时检测对照样本，包括空白对照、造模对照、阳性对照等。

* 抗体芯片检测过程中需要的最低蛋白量为多少？

抗体芯片检测过程中蛋白质需要经过标记与检测两个步骤，需要的最低蛋白量为总蛋白40 －100微克。

* 如果使用细胞样本，获得100微克总蛋白需要多少细胞？

由于细胞类型不同，每个细胞的蛋白含量也不尽相同。我们通常实验中使用 106 － 107 的细胞可提取大约 1 毫克蛋白质，其中大约 100ug 用来进行标记与杂交，因此我们推荐提供 5 × 106 细胞用于抗体芯片检测。

* 准备芯片检测样品前要注意什么？

答：样品尽量新鲜，组织样本冷冻前尽量去除血液等、血清不要有溶血发生、样品不要反复冻融。

* 可以使用除了抗体芯片配套试剂盒中的提取缓冲液以外的蛋白裂解试剂吗？

是的，在细胞或者组织裂解获得蛋白质的过程中是可以使用各种缓冲液的（如：RIPA裂解液），但是这些缓冲液不能包含 Tris 。因为 Tris 组分会影响到下一步的蛋白质标记步骤。因此，在使用含有 Tris 组分的缓冲液获得蛋白质之后，推荐使用 Millipore, Microcon YM-10 filters (Catalog: 42406) 或者 Sephadex G-25 columns 置换成标记缓冲液体系。

* 在裂解过程中需要加入蛋白酶抑制剂吗？

抗体芯片的配套裂解试剂中是不含蛋白酶抑制剂的。样本取来后，会在低温快速的情况下完成蛋白质提取、标记以及杂交过程。如果您需要自己裂解样本，那么推荐您在蛋白质裂解过 程中加入蛋白酶抑制剂。