代谢组取样

组织样本

动物组织

1. 首先准备好用于包装样本的铝箔或冷冻保存管，并且用油性记号笔在铝箔或冻存管外表

多处写明样本编号；

2. 准确切除所需组织后，立即剔除结缔组织和脂肪组织等非研究所需的组织类型。务必将

组织分割成小块；

3. 在生理盐水或PBS 中迅速漂洗样本，以去除血渍和污物；

4. 用镊子夹住样本，放入液氮中冷却样本；

5. 用准备好的铝箔或冷冻保存管装载包裹组织，迅速投入液氮或转入-80℃冰箱保存样本；

6. 填写样本登记单，写明样本名称、组织类型、编号、取样日期、样本处理过程等情况。

动物组织的量为 200mg/sample，保留备份，干冰低温寄送，避免反复冻融。

临床标本

1. 首先准备好用于包装样本的铝箔或冷冻保存管，并且用油性记号笔在铝箔或冻存管外表

多处写明样本编号；

2. 准确切除所需组织后，并将组织切割成小块，用镊子夹住样本，立即投入液氮冷冻；

3. 用准备好的铝箔或冷冻保存管装载包裹组织，迅速投入液氮或转入-80℃冰箱保存样本；

4. 填写样本登记单，写明样本名称、组织类型、编号、取样日期、样本处理过

程等情况。

临床组织的量为 200mg/sample，保留备份，干冰低温寄送，避免反复冻融。

植物组织

1. 准确取得所需组织后，用锡箔纸包裹，或放入进口冻存管中，拧紧管盖。锡箔纸或冻存

管要事先做好标记；

2. 立即投入液氮冷冻，然后于液氮中存放或转入-80℃超低温冰箱保存；

3. 填写样本登记单，写明样本名称、组织类型、编号、取样日期、样本处理过程等情况。

基因芯片，蛋白质组学植物组织的量为2g/sample，代谢组学植物组织的量为200mg/sample，

保留备份，干冰低温寄送，避免反复冻融。

血清、尿液样本

1. 血清

样品量要求

NMR 实验500ul/sample；GC-MS，LC-MS 实验200ul/sample；一定避免反复冻融。

样本收集步骤

血液收集在离心管中静置 30 分钟进行凝固分层。然后低速离心取上清装载干净的离心管中，

再高速离心5 分钟，取上清分装到冻存管中，每管0.5ml，-80 度冻存寄送。

注意事项

1）取血时如用酒精消毒，请擦干擦拭部位，待酒精完全挥发后再取样。

2）取血时如用麻醉剂，建议用异氟醚，防止在 NMR 血清谱图中出现干扰峰。

3）如要采用血浆，请务必使用肝素钠抗凝管。

2. 尿液

样本量要求

1ml/例，原则上可以多取一点。

样本收集步骤

晨起中段尿（临床）或晨间 1 小时尿（动物）直接分装到离心管中，每管1ml，

添加一滴（约 10ul）质量体积为1/100（w/v）的叠氮化钠，-80 度冻存寄送。

注意事项

1）动物1 小时尿量不够，可分多次收集，如果需要收取24h 尿液，请使用带有低

温装置的代谢笼收取，并添加叠氮化钠。

2）叠氮化钠的作用是防腐杀菌，有毒，请万分小心。

微生物样本

1. 酵母菌，真菌，细菌

菌体数量

1*108（一般OD600≈0.6 时，细菌处于生长指数其，浓度为108cells/ml。）为一

次实验的用量，最好给2 次实验的用量。

详细取样步骤

1）淬灭：培养好的菌液混匀后，取出1ml 菌液到10ml 离心管中，然后迅速加入预冷的淬

灭试剂60%甘油盐溶液（-23℃）4ml（-23℃预冷，甘油-盐溶液，3:2（v/v），如：向1.35%

的 NaCl 溶液200ml 中加入甘油300ml）。迅速涡旋混匀（vortex,2s），然后放入-20℃冰箱

冷冻（约5min）；

2）离心：将淬灭好的菌液进行离心，12000g，20min，-20℃；

3）漂洗：离心处理完毕后，去除上清，加入2ml 漂洗液（-20℃预冷，甘油-盐溶液，1:1（v/v）

如：向1.35%的 NaCl 溶液（200ml）中加入甘油（200ml）），涡旋混匀，离心，去除上清，

条件同上；

4）将沉淀（菌体）进行冻干处理；

5）冻存到-80℃冰箱内，干冰寄送到我公司。

2. 革兰氏阴性及革兰氏阳性菌（如枯草芽孢杆菌，大肠杆菌等）

菌体数量

1*108 为一次实验的用量，最好给2 次实验的用量。

取样步骤

1） 淬灭：70%冷甲醇（-70℃）

2） 快速过滤

3） 冻干，-80℃冻存

4） 低温寄送

3. 酵母（Yeast）

菌体数量

1*108 为一次实验的用量，最好给2 次实验的用量。

取样步骤

1） 淬灭：60%冷甲醇（-40℃）

2） 快速过滤

3） 冻干，-80℃冻存

4） 低温寄送

4. 木霉菌

菌体数量

1*108 为一次实验的用量，最好给2 次实验的用量。

取样步骤

1） 淬灭：20%冷甘油（-70℃）

2） 快速过滤

3） 冻干，冻存

4） 低温寄送