技术优势
· 检测片段长:扩增片段长度可达500bp
· 高灵敏度:可发现低至5%甲基化水平,样本起始量低至10 ng。
· 重复性好:变异系数CV≤5%。
· 高性价比:用384孔板进行PCR反应,一个扩增产物可以进行多重CpG位点分析,无需后续验证,可直接用于文章发表。
服务内容
1. 根据客户提供的序列信息进行预评估;
2. 进行样本DNA的分离、纯化、质检及亚硫酸盐修饰。
3. 使用特殊设计的一对引物扩增样本,得到带有T7 RNA聚合酶启动子序列的扩增产物。
4. 在体外转录体系中,利用T7 RNA聚合酶,将扩增产物转录为RNA片断。
5. 利用RNase A能够特异性识别并切割RNA中U 3’端的特性,将RNA片断切割成携带有CpG位点的小片断。
6. 使用sequenom®MassArray飞行质谱分析系统检测产物。由于同一片断中,只有CpG和CpA之间16Da的分子量差别,即质谱图中两者峰的差距。