细胞系鉴定和支原体检测

细胞STR鉴定

细胞遗传质量检测的重要性

细胞系作为正常或肿瘤组织的模式细胞被广泛应用于科学研究和药物开发，然而很大一部分的细胞系被错误标记或被其它个体、组织、种系来源的细胞所替代 。

细胞系错误鉴定问题已有50年历史，基于国际细胞库的分析数据显示：1984年细胞错误鉴定率为35%，1999年为18%，直到最近几年，应用于生物医学领域的细胞系需要鉴定的问题仍然很少有人关注。

细胞系错误鉴定所造成的后果

l   细胞系的损失

l   时间和金钱的损失

l   在公众领域（文献，专利等）提供错误信息

l   造成实验结果不一致或不可重复

l   个人：尴尬；公众：羞辱

细胞系鉴定与STR的关系

    STR（Short TandemRepeat，短串联重复序列）基因分型已被ICLAC、ATCC等权威机构作为金标准应用于细胞鉴定 。

    STR基因位点由长度为3～7个碱基对的短串连重复序列组成， 这些重复序列广泛存在于人类基因组中，可作为高度多态性标记，被称为细胞的DNA指纹。STR 基因座位上的等位基因可通过扩增区域内重复序列的拷贝数的不同来区分，在毛细管电泳分离之后可通过荧光检测来识别。随后通过一定的计算方法，即可根据所得的STR分型结果与细胞STR数据库比对从而推算出样品所属的细胞系或可能的交叉污染的细胞系名称。

云生物细胞系鉴定服务

      云生物为了进一步提高鉴定的分辨率，除了包含ATCC检测的8个STR和1个性别决定位点Amelogenin外，另新增了11个高度多态性位点 ，共检测20个STR位点。

服务流程

胞系鉴定服务流程

STR位点扩增 及毛细管电泳分离                

STR分型图谱及检测结果

服务特色

项目周期

数据分析

部分细胞鉴定客户论文发表

【1】Wang Y H, Wang J Q, Wang Q, et al. Endophilin B2 promotes inner mitochondrial membrane degradation by forming heterodimers with Endophilin B1 during mitophagy.[J]. Scientific Reports, 2016, 6.

【2】MoD, Fang H, Niu K, et al. Human helicase RECQL4 drives cisplatin resistance in gastric cancer by activating an AKT-YB1-MDR1 signaling pathway.[J]. Cancer Research, 2016.

【3】Hui Wang,Xiufei Liu,Min Long,et al.NRF2 activation by antioxidant antidiabetic agents accelerates tumor metastasis .Science Translational Medicine 13 Apr 2016.

支原体检测服务

支原体污染的危害

支原体是实验室中常见的污染细胞的原核生物，据统计约有15%－35%的细胞被支原体污染。支原体会改变宿主细胞的结构和功能等一系列特征，造成实验结果不准确；抑制细胞代谢和生长，改变核酸合成，影响细胞抗原性，导致染色体改变，干扰病毒复制以及模仿病毒的作用。因此，每一株外来细胞在进入实验室之前，都应进行支原体检测，并且应对培养中的细胞定期（如每2-3个月）进行支原体检测。

建立定期的监控方案，有助于提高科研效率，在污染发生早期及时处理，可避免支原体污染造成更大损失！

原理

利用qPCR（TaqMan探针法）检测支原体DNA，反应体系中同时存在标记两种颜色TaqMan探针及相关引物，分别检测支原体DNA和内模板。

翼和支原体检测优势

1、灵敏度：qPCR法最低的稳定检测至10拷贝的支原体DNA。

2、稳定：qPCR法全程闭管操作，无产物交叉污染。

3、可靠：通过内参扩增效率的检测，可有效检测试剂盒质量，样本中各类PCR抑制剂的影响，避免假阴性。

4、方便：操作简单，无需后期跑电泳步骤。

5、定量：通过CT值判断，可进行定量检测。结果可分为：阴性、弱阳性、阳性、强阳性，给科研人员提供更多的有用信息。

结果判断

支原体检测试剂盒