平台提供基于多种技术手段的miRNA 实时定量PCR技术服务,多年实战经验、大量案例积累、稳定的服务体系,为客户提供可靠的实验数据。客户只需要提供保存完好的组织(包括石蜡包埋的组织)、细胞、血液、血清或血浆等标本即可。
技术介绍
加尾法 | 茎环法 | Taqman探针法 | |
样品用量 | 1µg total RNA | 1µg total RNA | 1µg total RNA |
引物 | 通用反转录引物 | 茎环特异引物 | 茎环特异引物 |
qPCR | Sybrgreen法 | Sybrgreen法 | Taqman探针法 |
服务特点 | ※ RNA加尾和引物延伸法,样本用量少(1µg)且不需分离miRNA ※ 采用通用反转录引物,一次反转录产物可用于上百个miRNA检测 ※ 检测通量高,可同时检测数十个miRNAs ※ 不同末端成熟miRNA都能被加尾和反转录,保证定量准确性 ※ 配合QIAGEN试剂盒,保证实验可靠性 ※ 扩增产物特异性高,通过产物热解离曲线(融解曲线)判断 | ※ 高特异性:只对成熟MicroRNAs进行定量,而不受其前体干扰 ※ 快速简单:整个操作只需两步,不到3个小时,即可获得高质量的数据 ※ 灵敏:样品消耗少,仅需1-10ng的total RNA或同等物 ※ 超宽的线性范围:可跨越7个数量级 | ※ 特异性强:只检测成熟的microRNA,而不检测其前体及基因组DNA ※ 快速简单:容易操作,3h内就能得出高质量的结果 ※ 灵敏度好:对常规样品的检测只需要1~10ng的总RNA ※ 重现性佳:具有很高的准确性和重现性 ※ 动力学范围宽:即可检测几拷贝到几百万拷贝的人工合成miRNA或几ng到几十ng的总RNA。 |
材料要求
客户可提供组织(>100~200 mg)、细胞(>106),血液(1ml)、血浆或血清(1ml)、总RNA (>1µg),用于miRNA实时定量PCR检测的RNA样品,必须是高质量的,完整的,没有RNase 污染(降解样品不易定量,材料允许情况下,尽可能不用已降解的RNA),提取方法必须保证所得样品包含完整的小RNA部分。同时请提供尽可能详细的背景资料,包括样品来源、miRNA丰度、miRNA名称或序列等。
服务周期
样本合格后,根据样本多少,一般10-20个工作日。