实时荧光定量PCR,简称Q-PCR,是在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程,通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。Q-PCR技术已广泛应用于基因表达差异分析,SNP/甲基化检测,也可进行核酸定量分析,如检测基因拷贝数。Q-PCR一般使用Ct值定量,由于Ct值与模板初始拷贝数的对数成线性关系,利用一直其实拷贝数的标准品可作出标准曲线,只要获得未知样品的Ct值,即可从标准曲线上计算出该样品的其实拷贝数。
数据展示:
图1:qPCR 检测CNV的扩增曲线
图2:三个乳腺癌患者的CNV检测
这里显示的是:利用Agilent aCGH芯片对三个乳腺癌患者进行CNV的检测,然后用定量PCR对CNV位点进行验证。Breast Cancer Research, 2012, 14(1): R24.